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細胞轉瓶作為一種獨特的細胞培養裝置，已廣泛應用于多種貼壁細胞的培養，由細胞轉瓶培養的細胞如Vero細胞，HEK 293細胞，CAR-T細胞、MRC5等，以下是細胞轉瓶培養的操作步驟：

1.準備培養基：選擇適當的培養基，并將其預先加熱和平衡至適當的溫度。通常，培養基中還包含補充物（如生長因子、抗生素等）以提供細胞轉瓶培養細胞生長所需的營養物質和環境條件。

2.消毒操作：在進行培養前，確保工作環境和所用工具的無菌。使用合適的消毒劑（如70%酒精、消毒劑溶液等）對操作區域進行消毒，然后在無菌條件下打開細胞轉瓶的包裝。

3.倒出培養基：倒出適量的培養基，通常約為轉瓶容量的一半到三分之一，注意避免產生氣泡，確保細胞轉瓶內底部均勻覆蓋培養基。

4.細胞接種：將要培養的細胞懸浮于預先準備好的培養基中，使細胞密度達到所需的濃度。在培養期間，可以根據所需的細胞生長情況調整細胞接種密度。

5.環境條件：根據細胞轉瓶培養細胞的特性，提供適當的培養條件。這可能包括特定的溫度（通常為37°C）、濕度和CO2濃度。將轉瓶放入恒溫培養箱或細胞培養箱中，并根據要求調整相應的環境參數。

6.培養和觀察：在培養過程中，定期觀察細胞的生長情況、形態和健康狀態。根據需要，可以進行培養基的更換和細胞的傳代。

7.收獲細胞：在細胞生長至明顯匯合時（5～6天），移出培養液，加入0.25%胰蛋白酶，并滾動細胞轉瓶以收獲細胞。洗去胰蛋白酶，加入新鮮培養基，可轉入擴大再培養。

需要注意，以上步驟提供了一個基本的細胞轉瓶培養操作指南。具體的細胞培養條件和技術細節可能因細胞類型的不同而有所差異。因此，在進行細胞轉瓶培養之前，請參考相關的實驗室方案、技術手冊或專業指導，以確保實驗的成功和細胞的健康生長。